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elisa的od值是什么

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ELISA的OD值大概是多少: 怎么回有这样的说法呢?我可是头一次听你说。OD值是用酶标仪测定的,其范围一般在0-3之间,也有高于3.0的,其值的大小跟孔中颜色的深浅成比例,一般颜色深,OD值就比较高,另外ELISA所测定的OD值反应的结果一般是一定稀释度的抗体效价,如果你所用的抗体稀释度很小,效价很高的话,其OD值是会很高的。

可以用OD值直接作为ELISA最终结果吗: 在没有标准品的情况下,我认为可以先用一批样品在不同时间内分别做一块板(双复孔差不多能测47个样品),按照两次结果OD值由高到低的顺序自己选出几个样品,一般三个差不多(极低值,极高值,平均值相对应的样品),或根据自己实验要求进行选择,将选出的几个样品进行小量分装。以后如果比较不同板上的结果,可以每次都加上这三个对照作为质控标准,结果可以以所测样品与其中某一对照的比值来表示。这样应该有一定的意义。

ELISA知道OD值怎样算浓度: 需要有标准品的。用标准品的浓度和OD值做标准曲线,然后根据样品的OD值在曲线上计算浓度。

为什么ELISA的样品OD值如此的低:

可能是你样品的浓度太低,或者二抗的浓度太低,或者显色的时间太短,这些都是可能的原因,具体还需要再行实验验证

为什么我做ELISA很多OD值都为负数:

你的结果应该是已经扣除空白后的值吧!

国内试剂盒常常因为板子质量或制备过程中封闭不好,在加入酶标抗体温育洗涤后,很容易出现检测孔比空白孔值低的情况。你可以看看你的标注曲线除了0值点外,其余的OD值是否与标准品浓度相关,如果是的话,基本可以断定是这个原因。

处理好象没有好的办法,但是你可以试试改变实验条件,比如适当缩短加酶标抗体后的温育时间(抗原抗体反应很快,而蛋白吸附的时间较长,这样可以减少酶标物的吸附量而不影响检测结果),适当延长洗板次数和浸泡时间(尽量洗尽吸附的酶标物),测OD值得时候采用双波长等等。

实在不行的话,就不要扣除空白,而是将空白值与标准品一起做标准曲线,试验结果应该不会有太大的误差。

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